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维生素是人体生命活动必不可少的养分的东西,它们一般在动物和人体内不能组成或组成数量少,满意不了动物和人体的需求,有必要依托从食物中吸取。在食物中缺少任何一种维生素,人和动物都可能会产生特有的缺少症状,如缺少维生素A、B和C时,可别离引起夜盲症、脚气病和坏血病等,严峻时足以丧命。维生素含量的凹凸,是点评农产品质量的重要目标之一。
维生素广泛存在于各种生物体中,其种类十分之多,化学结构与功用各异。按其溶解性可分为脂溶性(VA、VD、VE、VK)和水溶性(VBl、VB2、VB6、VB12、VC)两大类。
维生素的剖析测定是一项很杂乱的作业。其样品剖析的一般程序是:首先用酸、碱或酶分化样品,使其间的维生素游离出来再用溶剂进行提取,提取后对样液进行别离提纯,最后用恰当的办法来进行定量等。维生素的前处理办法许多,选用办法时应根据样品的种类、类型、待测维生素的性质、含量以及搅扰物质多少等因从来决议。
1、 植物油脂称取2 g油样于25 mL的棕色容量瓶中,参加0.1g BHT,参加10 mL活动相于
MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋振动溶解后,用活动相定容至刻度,摇匀。过滤膜,待进样。
2 、奶油、黄油称取5 g样品于离心管中,参加0.1 g BHT 45℃水浴消融,参加5 g无水硫酸钠,
MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋1 min,混匀,参加25 mL活动相后MultiVortex涡旋振动提取,离心,将上清液彻底转移至浓缩瓶中,并将其放入FV32Plus全自动高通量智能平行浓缩仪上,于40℃水浴中浓缩至近干。用活动相定容10 mL,混匀。溶液过滤膜后,待测。
iQSE-02/06智能快速溶剂萃取仪提取其间的植物油脂,提取液于FlexiVap12/24全自动智能平行浓缩仪40℃水浴中氮吹浓缩至干,用10 mL活动相将油脂转移至25 mL容量瓶中,参加0.1g BHT,MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋振动溶解后,用活动相定容至刻度,摇匀。过滤膜,待进样。
1、皂化称取2 g试样于50 mL具塞离心管中,参加100 μL维生素 D2-d3和维生素D3-d3混合内标溶液,(含淀粉样品需参加0.4 g淀粉酶、10 mL约40℃温水,60℃避光恒温振动 30 min后,取出冷却)参加0.4 g 抗坏血酸、6 mL约40℃温水于
MultiVortex涡旋提取3 min,离心后转移上层清液到50 mL离心管,参加25 mL水,细微晃动30次,离心后取上层有机相备用。
iSPE-864全自动智能固相萃取仪中进行净化,搜集洗脱液于FV32Plus全自动高通量智能平行浓缩仪40℃下氮气吹干,参加1.0 mL甲醇,MultiVortex涡旋混匀,过有机滤膜供仪器测定。
皂化称取10 g固体试样或50 g液体试样于150 mL平底烧瓶中,固体试样需参加约30 mL温水,混匀,(若样品含淀粉时需参加1.0g淀粉酶, 60℃水浴避光恒温振动30 min后,取出)再加1.0 g抗坏血酸和0.1 g BHT,混匀,参加30 mL无水乙醇,参加20 mL氢氧化钾溶液,混匀后于80℃恒温水浴震动皂化30 min,冷却。
提取将皂化液转移至分液漏斗中,参加50 mL石油醚-混合液,振动萃取5 min,将基层溶液转移至另一分液漏斗中,参加50 mL的混合醚液再次萃取,兼并醚层。
洗刷用约100 mL水洗刷醚层,需重复 3 次,直至将醚层洗至中性,去除基层水相。
浓缩将洗刷后的醚层彻底转移至FlexiVap-12全自动智能平行浓缩仪上,于40℃水浴中氮吹浓缩至近干。用甲醇分次将蒸腾瓶中残留物溶解并转移至10 mL 容量瓶中,定容至刻度。溶液过有机相滤膜后供高效液相色谱测定。
皂化称取10 g固体试样或 50 g液体样品于150 mL平底烧瓶中,固体试样需参加30 mL温水,参加1.00 mL内标运用溶液(如测定维生素D2,用维生素D3作内标;如测定维生素D3,用维生素D2作内标,含淀粉样品需参加1g淀粉酶进行酶解),再参加1.0 g抗坏血酸和0.1 g BHT混匀。参加30 mL无水乙醇,参加20 mL氢氧化钾液,边加边振摇,混匀后于恒温磁力搅拌器上80℃回流皂化30 min,皂化后立即用冷水冷却至室温。
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